U R I N E

 

A.  JUDUL PERCOBAAN

URINE

B.  TUJUAN PERCOBAAN

Untuk menentukan zat-zat organik pada urine

C.  LANDASAN TEORI

Urine merupakan cairan sisa yang diekskresikan oleh ginjal yang kemudian  akan dikeluarkan dari dalam tubuh melalui proses urinasi. Ekskresi urine diperlukan untuk membuang molekul-molekul sisa dalam darah yang disaring oleh ginjal dan untuk menjaga homeostatis cairan tubuh. Namun, ada juga beberapa spesies yang menggunakan urine sebagai sarana komunikasi olfaktori. Urine disaring didalam ginjal, dibawa melalui ureter menuju kantung kemih, akhirnya dibuang melalui tubuh melalui uretra (Anonim, 2010).

Urine dikeluarkan oleh tubuh dalam bentuk cairan yang mengandung air, berbagai jenisgaram, senyawa nitrogen organik seperti urea, kreatinin, serta asam urat sebagai hasilmetabolisme. Setiap hari manusia mengeluarkan urine sekitar 1-1,5 liter dengan kadar zat kering 40-50 gram. BD urine adalah 1,0003-1,025 (Tim Dosen Biokimia, 2010 : 18).

Penyinaran dengan cahaya matahari atau ultraviolet mengurangi endapan perak klorida, yang menjadi abu-abu atau hitam karena terbentuknya logam perak.

AgCl      >  2 Ag         + Cl₂               

Reaksi ini lambat dan mekanismereaksi yang sesungguhnya sangatlah rumit. Halida perak yang lain menunjukkan sifat-sifat yang serupa. Fotografi didasarkan atas reaksi ini. Dalam kamera, proses-proses ini hanya dimulai dari bahan foto harus dikembangkan untuk menyelesaikan reaksi. Partikel-partikel perak yang abu-abu atau hitam muncul pada tempat-tempat yang telah disinari cahaya, maka diperolehnya gambaran negatif dari objek. Kelebihan perak halida harus dihilangkan (agar negatif yang telah dikembang takpeka lagi terhadap cahaya), yaitu dengan memfiksasi (Svehla, 1985 : 218).

Analisis urine secara fisik  meliputi pengamatan warna urine, berat jenis cairan urine, dan pH serta suhu urineitu sendiri. Sedangkan analisis kimiawi dapat meliputi analisis glukosa, analisis protein dan analisis pigmen empedu. Untuk analisis kandungan protein ada banyak sekali metode yang ditawarkan mulai dari metode uji milon sampai kuprisulfa dan sodium basa. Yang terakhir adalah analisis secara mikroskopik. Sampel urine secara langsung diamati dibawah mikroskop sehingga akan diketahui zat-zat apa sajayang terkandung didalam urine tersebut, misalnya, kalsium pospat, serat tanaman, bahkan bakteri (Anonim, 2010).

Urine mengenal protein dilakukan uji biuret yang menggunakan pereaksi Cu²⁺_(aq) encer dalam NaOH pekat dan memberikan warna ungu. Warna ungu ini disebabkan oleh terbentuknya senyawa kompleks dengan ion pusat Cu²⁺ dan gugus-gugus –NH₂ pada protein sebagai ligan. Uji lain untuk mengenal protein adalah uji xantoprotein dengan HNO₃ pekat dan NaOH pekat, menghasilkan warna kuning yang berubah merah tua (Liliasari, 1995 : 177).

Hans krebs dan Kurt Henseleit pada tahun 1932 mengemukakan serangkaian reaksi kimiatentang pembentukan urea. Mereka berpendapat bahwa urea terbentuk dari amonia dan karbondioksida melalui serangkaian reaksi kimiayang berupa siklus, yang mereka namakan siklus urea. Pembentukan urea ini terutama berlangsung dalam air, bersifat netral, terdapat dalam urine yang dikeluarkan dari dalam tubuh (Poedjiadi,Anna, 2006 : 321).

Menurut Anonim (2010), ciri-ciri warna urine yang tidak sehat yaitu :

1.    Merah muda, atau merah kecoklatan

2.    Kuning gelap atau orange

3.    Coklat bening dan gelap

4.    Hijau atau biru

D.  ALAT DAN BAHAN

1.      Alat : 

a. Rak tabung reaksi 1 buah

b.  Tabung reaksi 10 buah

c.   Gelas ukur 50 ml 1 buah

d.  Gelas ukur 10 ml 2 buah

e.   Labu erlenmeyer 250 ml 2 buah

f.   Labu semprot

g.  Gelas kimia 800 ml dan 250 ml 2 buah

h.  Bunsen, kasa asbes

i.    Penjepit tabung

j.    Kaca arloji

k.  Batang pengaduk

l.    Selang

m. Pipet tetes

2.      Bahan :

a.       AgNO₃ 0,1 M

b.      Ammonium molibdat

c.       HNO₃ pekat

d.      BaCl₂ 0,1 M

e.       HCl 0,1 M

f.        NaOH 0,1 M, 1 M, & 2,5 M

g.       Kertas lakmus

h.       Asam asetatp.a dan 0,1 M

i.         Sampelurine

j.        NH₄OH pekat dan 1 M

k.      (NH₄)₂SO₄ padat & jenuh

l.         Natrium nitroprusiad 5 %

m.     Pereksi benedict

n.       Pereaksi tollens

o.      Pereaksi fehling

p.      Urea padat

q.      CuSO₄ 0,01 M

r.        Pereaksi Nessler

s.       Glukosa 1%

t.        Ammonium oksalat

u.       Barium hidroksida

E.   PROSEDUR KERJA

Penentuan zat-zat organik

1.      Cl^-

Memasukkan 3 ml urine dalam tabung reaksi, kemudian menambahkan 5 tetes AgNO₃ encer. Mengamati.

2.      PO₄^3-

Memasukkan 3 ml urine dalam tabung reaksi, kemudian menambahkan 1 ml ammonium molibdat dan beberapa tetes HNO₃ pekat. Mengamati

3.      SO₄^2-

Memasukkan 3 ml urine dalam tabung reaksi, kemudian menambahkan 3 tetes BaCl₂ 0,1 M dan 3 tetes HCl 0,1 M. Mengamati lalu menyaringnya. Menyimpan filtratnya.

4.      NH₄⁺

Memasukkan 3 ml urine dalam tabung reaksi, kemudian menambahkan setetes demi setetes NaOH 0,1 M sampai suasana basa. Membagi dua, bagian pertama dipanaskan sambil alirkan gas yang terbentuk kedalam larutan Ba(OH)₂. Bagian kedua, panaskan sambil dialirkan gas yang terbentuk kedalampereaksi Nessler. Mengamati.

5.      Ca²⁺

Memasukkan 5 ml urine dalam tabung reaksi. Menambahkan 3 tetes ammonium oksalat jenuh dan beberapa tetesasam asetat.mengamati.

6.      Mg²⁺

Memasukkan 10 ml urine dalam tabung reaksi, menetesi NaOH 0,1 M sampai suasana basa, menetesi dengan asam asetat 0,1 M sampai suasana asam. Menambahkan ammonium oksalat jenuh sampai terbentuk endapan. Meenyaring, filtrat ditambah NH₄OH 1 M, jika tidak ada endapan tutup dengan kapas dan biarkan semalam.

7.      Tes Nitroprusid Kreatinin

Memasukkan 5 ml urine kedalam tabung reaksi, menambahkan 5 tetes natrium nitroprusit 0,1 M. Menambahkan NaOH 1 M tetes demi setetes sampai warna merah terbentuk. Didihkan. Mengasamkan dengan hati-hati dengan asam asetat glasial lalu panaskan selama satu menit. Mencatat semuaperubahan yang terjadi.

8.      Tes Terhadap Badan-badan Keton

Menjenuhkan 10 ml urine dengan (NH₄)₂SO₄ padat. Menambahkan 2-3 tetes na-nitroprusid 5% dan 1-2 ml NH₄OH pekat. Mencampurkan dengan baik, membiarkan selama 30 menit. Mengamati perubahan yang terjadi.

9.      Tes Gula-Gula pereduksi

Mengambil3 tabung reaksi lalu mengisi dengan 5 tetes urine. Menambahkan masing-msing dengan 5 ml pereaksi benedict, fehling dan tollens. Memasukkan dalam penangas air sampai mendidih beberapa saat. Mengulangi percobaandengan mengganti urine dengan glukosa 1%.

10.  Pembentukan Biuret

Memanaskan 1 gram urea dalam tabung reaksi.memperhatikan bau yang timbul setelah melebur, melanjutkan pemanasan sampai membeku. Mendinginkan dan menambahkan 2 ml aquadest, mengocok lalu menambahkan 1 ml NaOH 2,5 N dan menambahkan tetes demi setetes CuSO₄ 0,01 M sampai terjadi perubahan warna.

F.   HASIL PENGAMATAN

Penentuan zat-zat organik

1.        Cl^-

Urine (kuning) 3 ml + AgNO3 encer (bening)                larutan keruh, endapan putih 

2.   PO₄^3- 

3 ml urine (kuning) + 1 ml ammonium molibdat (bening) + 3 tetes HNO_3(p)          Larutan hijau muda, endapan putih

3.      SO₄^2-

3 ml urine (kuning) + 3 tetes BaCl₂ 0,1 M + 3 tetes HCl 0,1 M               putih keruh, ada endapan

4.        NH₄⁺

3 ml urine (kuning) + 5 tetes NaOH +  1. Tabung I larutan urine   + Ba(OH)₂         larutan warna putih, ada endapan. 2. Tabung II larutan urine + pereaksi Nessler      -----           larutan orange, ada endapan

5.        Ca²⁺

5 ml urine + 3 tetes (NH₄)₂C₂O₄ + 3 tetes CH₃COOH_(p)                   larutan kuning

6.        Mg²⁺

5 ml urine + beberapa tetes NaOH 0,1 M  + suasana basa + beberapa tetes CH₃COOH 0,1 M  suasana asam + (NH₄)₂C₂O₄ sampai terbentuk endapan filtrat + NH₄OH 1 M   -----------  terbentuk endapan

7.        Tes Nitroprusid Kreatinin

5 ml urine + 5 tetes na-nitroprusid 0,1 M + NaOH 1M              larutan kemerahan + asam asetat glasial (3 tetes)                         biru kehijauan

8.        Tes Terhadap Badan-badan Keton

10 ml urine + (NH₄)₂SO₄ padat      larutan jenuh + 3 tetes na-nitroprusid 5% + 2 ml  NH₄OH pekat               laruta bening > positif terbentuk 2 lapisan (lap. Atas kuning, lap. Baawah bening) dan terbentuk cincin orange

9.        Tes Gula-Gula pereduksi

Ø  5 tetes urine + 5 ml benedict                 larutan biru tua                   endapan merah bata

Ø  5 tetes urine + 5 ml tollens         larutan putih keruh                  cermin perak          

Ø  5 tetes urine + 5 ml fehling A                   larutan biru muda                 hijau

Ø  5 tetes urine + 5 ml fehling B                   larutan bening                hijau

Urine diganti dengan glukosa dan diperoleh hasil yang sama dimana urine mengandung glukosa.

10.    Pembentukan Biuret

1 gram urea   bau amonia   putih   + 2 ml aquadest  + 1 ml NaOH 2,5 N                larutan bening + CuSO₄ 0,01 M (hijau)

                   Larutan ungu

G.  PEMBAHASAN

Percobaan ini berfungsi untuk menentukan zat-zat organik pada urine. Pada penetuan Cl^-, urine direaksikan dengan AgNO₃ encer yang berfungsi untuk membentuk endapan putih dari AgCl. Adapun reaksi yang terjadi yaitu :

Cl^- + AgNO₃   ---------à  AgCl    + NO₃^-

Pada penentuan PO₄^3-, urine ditambahkan dengan ammonium molibdat yang berfungsi untuk menghasilkan endapan berwarna putih, kemudian ditambahkan dengan HNO₃ pekat yang menghasilkan warna hijau. Adapun reaksi yang terjadi yaitu :

H₃PO₄ + 12 (NH₄)₂MoO₄ + 21 HNO₃    ------à [(NH₄)₂PO₄.12MoO₄.6H₂O] + 21 NH₄NO₃ + H₂O

Pengujian SO₄^2-, urine ditambahkan dengan BaCl₂ akan menghasilkan endapan putih kemudian ditambahkan dengan HCl yang berfungsi untuk mengasamkan larutan.adapun reaksi yang terjadi yaitu :

SO₄^2- + BaCl₂ + HCl    ------à    BaSO₄   + 3 Cl^- + H⁺   

Penentuan NH₄⁺, urine yang ditambahkan dengan NaOH sampai suasana basa, kemudian larutan tersebut dibagi menjadi dua bagian pada dua tabung reaksi. Pada tabung pertama dipanaskan sambil dialirkan gas yang terbentuk kedalamlarutan Ba(OH)₂ menghasilkan larutan berwarna putih dan terdapat endapan. Dimana endapan tersebut merupakan endapan Ba²⁺. Adapun reaksinya :

NH₄⁺  + OH^-             ---à       NH₃    + H₂O

NH₄⁺  + Ba(OH)₂     ---à        NH₄OH + Ba²⁺ 

Sedangkan pada tabung II dipanaskan dan dialirkan gas kedalam pereaksi Nessler menghasilkan larutan berwarna orange dan terdapat endapan yang merupakan endapan merkurium (II). Adapun persamaan reaksinya :

NH₄⁺ + 2HgI₄^2- + 4OH^-         -----à      HgO.Hg(NH₂)I    + 7 I^- + 3 H₂O

Pada pengujian Ca²⁺, urine ditambahkan dengan ammonium oksalat dan asam oksalat menghasilkan larutan berwarna kuning. Untuk uji positif ditandai dengan terbentuknya endapan putih dari kalsium oksalat. Adapun reaksinya yaitu :

Ca²⁺ + (NH₄)₂C₂O₄        ----à    CaC₂O₄       + 2 NH₄⁺

                                     Endapan kalsium oksalat

Pada pengujian Mg²⁺, urine ditambahkan dengan NaOH sampai suasana basa, kemudian ditambahkan dengan CH₃COOH sampai suasana asam. Setelah itu ditambahkan dengan (NH₄)₂C₂O₄ sampai terbentukendapan MgC₂O₄ yang berwarna putih. Adapun reaksi yang terjadi yaitu :

Mg²⁺ + 2 NaOH        -----à      Mg(OH)₂ + 2 Na⁺

Mg(OH)₂ + CH₃COOH    ---à     CH₃COO^- + Mg²⁺ + H₂O

Mg²⁺ + (NH₄)₂C₂O₄       ---à    MgC₂O₄      + 2 NH₄⁺

Pada pengujian nitroprusid kreatinin, urine ditambahkan natrium nitroprusid dan NaOH menghasilkan larutan berwarna merah kemudian dipanaskan dan ditambahkan dengan asam asetat glasial hingga diperoleh larutan berwarna biru kehijauan, dimana warna biru karena terbentuknya biru prusian. Adapun reaksi yang terjadi yaitu :

Na[Fe(CN)₅NO] + NaOH + 2CH₃COO-       ----à  2CH₃COONa + [Fe(CN)₅NO]²⁺ + OH-

Pada pengujian terhadap badan-badan keton, akan diketahui keberadaan gugus keton pada urine. Pertama urine ditambahkan dengan (NH₄)₂SO₄ padat sampai larutan jenuh, kemudian ditambahkan dengan na-nitroprusid dan NH₄OH pekat dan diperoleh larutan bening. Kemudian didiamkan selama 30 menit diperoleh dua lapisan, lapisan atas berwarna kuning dan lapisan bawah bening dan juga terbentuk cincin orange. Pengujian positif jika diperoleh larutan berwarna ungu sesuai reaksi berikut :

 (NH₄)₂SO₄ + Na₂Fe(CN)₃NO + NH₄OH         ----à    Na₂SO₄ + Fe(CN)₃NO + H₂O

Hal ini terjadi karena larutan yang digunakan sudah terkontaminasi dengan larutan lain atau udara luar.

Pada pengujian gula-gula pereduksi, digunakan pereaksi benedict, pereaksi tollens dan pereaksi fehling.

Ø Untuk pereaksi benedict, urine ditambahkan dengan pereaksi benedict menghasilkan larutan berwarna biru, kemudian dipanaskan dan diperoleh endpan merah bata yang merupakan uji positif dari benedict dimana Cu²⁺ direduksi menjadi Cu⁺ yang berwarnamerah bata.

Ø Untuk pereaksi tollens, urine ditambahkan dengan pereaksi tollens menghasilkan larutan putih keruh yang menandakan pengujian negatif, kemudian dipanaskan diperoleh cermin perak, dimana Ag⁺ direduksi menjadi Ag. Adapun reaksi yang terjadi yaitu :

Ø Untuk uji fehling, urine ditambahkan dengan feehling A dan fehling B menghasilkan warna biru, kemudian dipanaskan diperoleh larutan hijau.

Hal ini disebabkan karena larutan yang digunakan sudah terkontaminasi dengan larutan lain.

Kemudian mengganti urine dengan glukosa dan dilakukan pengujian dengan benedict, tollens dan fehling dan diperoleh hasil yang sama, ternyata urine mengandung glukosa.

Pada pengujian biuret, urine dipanaskan (bau amonia) hingga melebur dan berbau amonia, kemudian dilanjutkan  pemanasan hingga urea membeku kembali. Setelah dingin ditambahkan dengan aquadest, NaOH dan CuSO₄ menghasilkan warna ungu. Hal ini menandakan ada biuret dalam larutan. Adapun reaksi yang terjadi yaitu :

        O                                                           O

NH₂-C-NH₂ + NH₂-C-NH₂                  NH₂-C-NH-C-NH₂ + NH₃ 

                                                                                  O

H.  PENUTUP

1.      Kesimpulan

Berdasarkan percobaan dapat disimpulkan :

a.       Urine mengandung ion Cl-, PO43-, SO42-, NH4+, dan Mg2+

b.      Urine mengandung senyawa keton

c.       Urine mnegandung gula-gula pereduksi

d.      Biuret dapat dibuat dari urea

2.      Saran

Sebaiknya praktikan lebih teliti dalam percobaan agar diperoleh data yang lebih akurat dan selalu menjaga kebersihan.